科學家發表宿主抵抗HBV感染機制的最近研究成果

　　乙型肝炎是中國人群中高發的一類傳染型疾病，乙肝會導致肝功能障礙，肝硬化以及肝癌的發生。引起乙肝的是一種B型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）。

　　宿主對外援病原體的入侵具有一系列的抵抗機制。對于病毒來說，其攜帶的DNA或RNA分子能夠被細胞內部的各類感受器分子識別（如病毒5'磷酸化或雙鏈RNA可以被RIG-I（retinoicacid-induciblegene-I）分子識別），通過下游一系列的信號傳遞機制，產生大量I型及III型干擾素，起到殺傷病毒的作用。然而，目前對于HBV的免疫機制研究還不是很清楚。之前的研究發現：對于HBV的感染，宿主產生的I型干擾素遠不如HCV（丙型肝炎病毒）的感染。

　　最近，日本北海道大學遺傳醫學研究所的AkinoriTakaoka課題組在《immunity》雜志發表了他們對于宿主抵抗HBV感染機制的最近研究成果。

　　首先他們向人肝細胞系中轉染HBV基因組，并對隨后細胞各類干擾素的表達情況做了檢測。結果顯示：干細胞產生極少的I型干擾素，但能夠產生明顯的III型干擾素（IFN-λ）。另外，干擾素的產生受到病毒復制的影響：通過藥物處理人為地將病毒復制能力抑制住將不會看到INF-λ的產生。

　　之后作者對哪一類感受器分子介導了INF-λ的產生做了研究。他們通過RNAi的手段分別將細胞內已知的感受病毒DNA或RNA的感受器分子進行抑制。結果顯示，只有當RIG-I被抑制時，病毒基因組轉染導致的INF-λ爆發才能得到抑制。同樣，作者人為抑制了RIG-I下游已知的信號傳導分子（TRIM25，MAVS，TBK，IRF-3），發現III型干擾素的產生同樣受到了影響。說明RIG-1是這一信號傳遞過程的關鍵分子。

　　那么RIG-I是如何感受到病毒的存在的呢？之前的研究證明RIG-I能夠識別DNA以及RNA，作者希望了解在HBV的感染中，RIG-I的識別對象DNA還是RNA。因此，作者純化了HBV感染后的肝臟細胞的核酸組織（其中含有病毒核酸），分別用DNA酶與RNA酶進行消化，隨后將核酸組織刺激肝臟細胞。結果顯示：當經過RNA酶消化后，肝臟細胞產生INF-λ的能力下降了，暗示了RNA可能是RIG-I的配體。已知HBV是一類DNA病毒（即遺傳物質為DNA），其DNA的復制需要依賴于一個中間體RNA完成。

　　作者針對HBV轉錄生成的各類RNA均設計了siRNA進行干擾，結果顯示：siRNA處理后的病毒感染不再引起肝臟細胞表達INF-λ。作者通過突變分析發現：HBV復制過程中產生的3.5kb的pregenomicRNA（pgRNA），特別是其5'端的序列，對于RIG-I的識別具有非常重要的作用。隨后的體外生化試驗也完美地證明了RIG-I與HBVpgRNA的5'端具有特異性的相互作用。

　　最后，作者通過生化實驗發現RIG-I能夠同時結合pgRNA以及病毒本身的聚合酶（主導DNA的復制）。功能檢測發現這種結合方式有效抑制了病毒的復制。

　　綜上，這項研究發現RIG-I是響應HBV入侵的信號感受器，可以通過經典的抗病毒免疫信號通路激活INF-λ的表達；此外，RIG-I還可以直接作用于病毒pgRNA以及聚合酶，從而抑制其復制。